中的关键质量控制 全尺寸桌子 mRNA的结构元件 mRN。真核生物中,RNA聚合酶在体内将基因转化为初级mRNA转录物时合成前体mRNA,该转录物通常仍含有非编码序列内含子,并通过mRNA加工(包括5′ mRNA加帽、修饰、剪接等)进一步去除成为成熟mRNA。 A 到 I 编辑。18IVT成熟mRNA的制备包括几个步骤,线性DNA模板获得、IVT、5’加帽和添加po 溶酶体相关膜蛋白的信号肽。76总之,每个步骤的 mRNA 质量控制与其功效直接相关;因此,mRNA的生产和制备是基于mRNA的治疗的关键。 RNA化学式设计 自我扩增RNA 与常规mRNA相比,自扩增RNA(saRNA)是另一种结构不同的mRNA分子。77 , 78 saRNA 主要源自甲病毒结构,并通过用感兴趣的基因
转移到细胞聚腺
酸结合蛋白 (PABP) 与聚腺苷酸尾部结合,并与真核翻译起始因子 (eIF) 相互作用。eIF 与 5′ 帽、UTR、PABP、起始子甲硫氨酰转移 RNA (tRN比利时电话号码表A) 和 40S 核糖体亚基相互作用,导致 mRNA 环化并形成起始复合物。40S核糖体亚基扫描转录起始密码子后,60S核糖体亚基被招募并释放eIF以开始氨基酸链延伸。19成熟的 mRNA 包括编码区、UTR、poly(A) 尾和 5′ 帽,可被核糖体识别
并由 携带以产生蛋
白质。与 DNA 一样,mRNA 中的遗传信息包含在核苷酸序列中,这些核苷酸序列排列成密码子,每个密码子由三个核糖核苷酸组成。因此,进行IVT mRNA,通过刺激真核mRNA合成机制,在体外完成RNA的转录,保证mRNA在体内的欧洲邮箱表达(图3 )。因此,mRNA 的优化对于成功的基于 mRNA 的治疗至关重要。 图3 图3 体外转录(IVT)mRNA和翻译起始。IVT mRNA制备包括几个步骤:质粒克隆、质粒线性化、体外转录、5’加帽和添加poly(A)尾。